Cántico espiritual está basado en el Cantar de los cantares, libro de la Biblia de contenido amoroso que describe alegóricamente la alianza sagrada entre Dios y el pueblo elegido. Los cristianos acostumbraban a describir la unión entre Dios y la Iglesia en estos términos, si bien el poeta prefiere identificar a la esposa con el alma. El poema relata en detalle el proceso espiritual que permite la unión del creyente con Dios. La Noche oscura insiste en el necesario abandono de los bienes sensibles en la búsqueda de Dios, y Llama de amor viva describe el gozo de la unión mística. Sus otros poemas, de menor extensión e importancia, demuestran una señalada influencia de la lírica popular, aunque conservan siempre la motivación o temática religiosa.